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疫病防控

PREVENTION AND CONTROL

禽血液樣品的采集與保存方法
發布時間:2018-07-02

隨著我國養雞業規模化、集約化進度的加快,雞病也呈現出新的特點,如混合感染增多,病症複雜化和非典型化。K8凯发国际官网免疫在重大動物疫病防控中起著舉足輕重的作用,而在免疫效果監測和輔助疫病診斷中,血液樣品的采集方法、數量和質量直接決定著監測結果的准確性和監測結論的科學性,准確快速的采血技術還可以減少雞只應激,避免造成雞只不必要的死亡。血樣的采集看似簡單,但真正操作起來,其難度和強度較大,集專業知識和操作技巧于一體。現就血液樣品的采集、血清的分離、運輸及儲存做如下簡要說明。

1、采樣數量

每棟雞舍按千分之三采樣量,但不能低于10份血樣。

2、采血方法

臨床上常用的方法有翅靜脈采血、頸靜脈采血和心髒采血。

2.1 雏鸡采血

雏鸡多采用心脏采血 左手抓鸡 ,右手持采血针,平行颈椎从胸腔前口插入,回抽。有血液回流时,将针芯向外拉,使血液流入针管。

颈静脉采血 采血者左手食指和中指夹住鸡头部,并使头部偏向一侧,拇指按压颈椎使颈静脉怒张,手掌和其他手指保定住鸡只。右手持注射器,将针头沿血管方向以45°的角刺入颈部皮肤及血管,在与血管平行进针0.2~0.5 cm抽取血液,采血完毕后用干棉球按压采血部位并退出针头,防止出血。

2.2 青年鸡和成年鸡的采血

翅靜脈采血:采血者左手撥開翅內側羽毛,在翅下靜脈處消毒,右手持注射器與皮膚呈45°方向順著血管進針,見有血液回流即把針芯緩慢外拉,使血液流入針管,每只雞采血液1~2ml做好標記。

翼根采血:侧卧保定禽只,展开翅膀 ,露出腋窝处,拔掉羽毛,用酒精棉球消毒。拇指按压近心端,待血管怒张后,用5mL一次性注射器,由翼根向翅方向平行刺入静脉,放松对近心端的按压,外拉针芯,缓慢抽取血液。

心髒采血:此方法多用于血液需要量較多時。將雞仰臥保定,針頭從V型鎖骨前端刺入,或者在靠近心髒的胸側壁刺入;心髒采血過程中,如果操作不慎,易損傷肺髒,更有慎者,引起大出血死亡。

3、血清的分離

用注射器采集血液後,拔掉針頭,注入1.5毫升EP管中,一般血液在室溫下(18℃~25℃)放置2~4小時,血清會自然析出,將EP管放在25~37℃溫箱內lh或置于4℃冰箱內過夜,必要時用離心機以l500~2000r/min離心5min,分離血清。在一次性注射器中自然析出血清時,注射器中應吸入1~2mL空氣,待大部分血清析出後,將血清移至EP管中,蓋上管蓋,用記號筆做好標記。

注意:血清顔色呈淺黃色、半透明較好,盡量避免溶血;膠凍狀血清的成因:采血前剛喂食(沒有空腹);凝血時間不夠;脂肪血(營養過剩)。

4、血清的保存與運送

4.1血清樣品的保存

通常分離到的血清樣品保存于EP管中,存放于4℃冰箱內或冷凍。

4.2血清樣品送檢流程

如果樣品能在24小時內送達檢測中心,可于4℃保存,如果24小時內不能送達檢測中心,樣品必須冷凍處理後,嚴格包裝,冷鏈運輸(密閉封裝並加冰袋運送)。同時要填寫詳細的樣品記錄。

注意:包裝發貨前,請檢查EP管管蓋是否扣緊,以防運輸途中樣品遺漏。

5、血清的解凍

血清不宜反複凍融。反複凍融會使血清中的脂蛋白和纖維蛋白變性,導致出現絮狀沈澱物,影響檢測結果的客觀准確性。

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